產(chǎn)品介紹

人類免疫缺陷病毒1/2抗體檢測(cè)試劑盒(明膠凝集法)

1  適用范圍

日本富士瑞必歐公司出品的PA試劑盒進(jìn)行體外檢測(cè)人血清或血漿中的HIV抗體。

2  原理

試劑的主要成分是帶有滅活的HIV抗原（通過去污劑裂解、純化而來）致敏的乳膠顆粒，這些致敏顆粒能與血清或血漿樣品中存在的HIV抗體產(chǎn)生凝集。

3  試劑盒內(nèi)包含物

凍干對(duì)照粒子、凍干致敏粒子、陽(yáng)性對(duì)照、復(fù)溶液、樣品稀釋液、滴管

4    其他所需物品和儀器

4．1一次性手套

4．2一次性PA板

4．3加樣器（50μl、100μl、1ml）準(zhǔn)確度±2％及一次性加樣頭

4．4計(jì)時(shí)器

4．55％次氯酸鈉、70%酒精及其他認(rèn)可消毒液（如康力、84消毒液等）

4．6適于盛裝有可能受污染物品的容器

4．7微板振蕩器，用于混合試劑顆粒與樣品

5  標(biāo)本的收集和準(zhǔn)備

標(biāo)本的收集詳見“SOP-HIV01 HIV檢測(cè)標(biāo)本的采集和處理”。

6  試劑準(zhǔn)備

6．1在開始實(shí)驗(yàn)之前標(biāo)本和試劑應(yīng)處于室溫（18～25℃），實(shí)驗(yàn)應(yīng)在室溫下進(jìn)行，使用后試劑放回2～8℃。

6．2分別吸取復(fù)溶液1ml和0.6ml于凍干對(duì)照粒子試劑瓶和凍干致敏粒子試劑瓶中，充分搖勻；如果是已經(jīng)溶解的試劑，則只需充分搖勻。

7  試驗(yàn)步驟

7．1加75μl樣品稀釋液于*孔，第二孔與第三孔各加25μl。

7．2加25μl樣品于*孔，充分抽提混合3～4次，吸出25μl于第二孔，充分抽提混合吸出25μl于第三孔，充分抽提混合后棄去25μl。

7．3加1滴（25μl）對(duì)照顆粒子于第二孔，加1滴（25μl）致敏粒子于第三孔。

7．4用振蕩器充分混合后蓋上蓋子，置室溫（15℃～25℃）2小時(shí)后觀察結(jié)果，反應(yīng)期間不得再次振蕩。

7．5每次試驗(yàn)均要有陽(yáng)性對(duì)照。

7．6詳細(xì)記錄下試驗(yàn)步驟、試劑批號(hào)、有效期、試驗(yàn)時(shí)間及標(biāo)本有關(guān)資料。

8  結(jié)果判斷

8．1陰性反應(yīng)：顆粒在孔中間聚集成圓形小塊且邊緣光滑。

8．2不確定反應(yīng)：顆粒在孔中凝集成致密環(huán)狀且邊緣光滑。

8．3陽(yáng)性反應(yīng)：孔內(nèi)有清晰的寬環(huán)且邊緣粗糙。

8．4強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)：孔內(nèi)的凝集顆粒形成均一的膜覆蓋在整個(gè)孔底。

8．5樣品與對(duì)照粒子呈陰性反應(yīng)，與致敏粒子呈陽(yáng)性反應(yīng)時(shí)為可疑陽(yáng)性血清。

8．6樣品與非致敏顆粒及致敏顆粒均產(chǎn)生凝集者，則需將標(biāo)本進(jìn)行吸收處理后再檢測(cè)。（見吸收步驟）

8．7對(duì)于陽(yáng)性標(biāo)本均按照“HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本處理制度”進(jìn)行處理。

9  吸收步驟

9．1加350μl對(duì)照粒子溶液于小試管中。

9．2加50μl標(biāo)本于試管中，充分混合并于室溫孵育20min（孵育期間用手搖動(dòng)12次）。

9．3以2000r/min離心5min，小心地吸出上層液（標(biāo)本稀釋度1：8）50μl于PA板的第2孔。

9．4加25μl標(biāo)本稀釋液于微板的第3孔中。

9．5吸取第2孔內(nèi)的液體25μl于第3孔中，充分抽提混合后棄去25μl。

9．6其余操作同步驟7.3～7.6。 

10  稀釋倍數(shù)表

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